角膜モデル OCL

特長・用途

Character And Applications

品質特性：ヒト正常表皮角化細胞から構成された角膜モデル

ヒト角膜構造に類似した3次元構造

ヒト正常表皮角化細胞（NHEK）を気液界面（Air-Liquid Interface: ALI）培養により分化させ、ヒト角膜上皮に類似した多層構造（角膜様上皮）を形成した3次元モデル
生体角膜の形態学的・生理学的特性を模倣し、細胞の分化により層構造を形成

動物安全性試験代替モデルとしての豊富な研究実績

眼刺激性試験（OECD TG492）に対応した再構築ヒト角膜様上皮モデル（RhCE）です。
世界各国で実施されたバリデーション研究および多施設共同研究により有用性が確認されており、ウサギ眼刺激試験（Draize test）や臨床試験の削減のための有用なツールとして注目されており、化粧品、家庭用品、化学品および農薬分野の企業、研究機関および規制機関で広く利用されています。
眼刺激性試験（OECD TG492）、MTT ET-50法、農薬製剤評価、Defined Approaches（DA）など幅広い用途で利用され、多数の学術論文が報告されています。

特長

MatTek Corporation（USA）により開発

EpiOcularは1995年の販売開始以来、長期間生産ロットのばらつきが小さく、高い再現性を保持しています。MatTek　US、EU拠点で製造され、EpiDermとともに北米、南米、欧州、アジアなど世界各国で利用されています。

国内評価・活用実績

クラボウは1998年より国内販売および技術サポートを行っています。
MatTek社との共同研究では、米国から日本への長時間輸送を経た後もEpiOcularの試験性能および高い再現性が維持されることを確認しました。この成果は、EpiOcular Eye Irritation Test（EIT）の信頼性を裏付ける知見として活用されています。 ・参考文献 The EpiOcular Eye Irritation Test (EIT) for Hazard Identification and Labelling of Eye Irritating Chemicals:Protocol Optimisation for Solid Materials and the Results after Extended Shipment Y Kaluzhny, H Kandarova, Y Handa, et al. Altern Lab Anim May;43(2):101-27(2015) 角膜3次元モデル　EpiOcular 眼刺激法（OCL-200 EIT）長時間輸送による影響 半田由希, Y Kaluzhny Y, H Kandarova 日本動物実験代替法学会JSAAE2015 Poster P-06 医薬部外品・化粧品の安全性評価における眼刺激性試験代替法としての再構築ヒト角膜様上皮モデル法（RhCE法）に関するガイダンス 薬生薬審初0624第1号　令和元年（2019年）6月24日

納品後すぐに実験可能、簡単な操作で安全性評価が行えます

Ready-to-use製品として提供されるため、受け入れ後すぐにin vitro試験を開始できます。
独立した培養カップに培養されており、サンプルの添加、培養などの取扱いが簡単です。
MTTアッセイキットを用いて培養カップごと簡単にMTT反応、抽出が行えます。
脂溶性サンプルや粘性サンプル、粉体状のサンプルなど多様な試験物質に適用できます。 ・参考文献 TR191 The epiocular tissue model: in vivo versus in vitro draize scores for consumer products. Klausner Eye irritation hazard of chemicals and formulations assessed by methods in vitro. D Jirova,K Kejlova, Neuro Endocrinol Lett. 2014:35 Suppl 2:133-40.

用途

眼刺激試験（Eye Irritation Test）

化粧品、化学品、家庭用品、農薬製剤などの眼刺激性評価に使用されます。
細胞生存率に基づき、刺激性を評価します。

• ・OECDテストガイドライン TG492　　対応キット：OCL-200EIT
• ・MTT ET-50法　対応キット：OCL-200

いずれもMTT-アッセイキット（MTT-100-JP）をご使用ください。

OECD テストガイドライン　EpiOcular EIT

OECD TG492　OECD ガイドラインは2015年再構築角膜様モデルを用いた眼刺激試験法として認可され、EpiOcularが採択されました。
細胞生存率MTTを指標とし、サンプルの非刺激性を判定する方法です。
判定基準：カットオフ60％を採用　
生存率>60％　刺激なし　（国連 GHS　区分外/No Category）
生存率≦60％　刺激性　 （国連 GHS　Category１またはCategory２）
近年はOECD TG467やBCOP法との組み合わせによるDefined Approaches（DA）にも利用されており、GHS分類や米国環境保護庁 US EPA分類に対応した危険有害性評価法として活用されています。化粧品、化学品、家庭用品および農薬製剤分野において豊富な研究実績があります。 ・参考文献 TR653　Development of the EpiOcular™ Eye Irritation Test for Hazard Identification and Labelling of Eye Irritating Chemicals in Response to the Requirements of the EU Cosmetics Directive and REACH Legislation. Y Kaluzhny, H Kandarova, et al. Altern Lab Anim. 2011 Sep;39(4):339-64. TR824 CON4EI: EpiOcular™ Eye Irritation Test (EpiOcular™ EIT) for hazard identification and labelling of eye irritating chemicals H. Kandarova, S. Letasiova, et al. Toxicol In Vitro. 2018 Jun:49:21-33. TR729 Cosmetics Europe multi-laboratory pre-validation of the EpiOcular™reconstituted human tissue test method for the prediction of eye irritation U Pfannenbecker, et al.Toxicol In Vitro. 2013 Mar;27(2):619-26 TR1094 Defined approaches to predict GHS and EPA classifications for ocular irritation potential of agrochemical formulations AB Daniel 1, Anna J van der Zalm, et al.Cutan Ocul Toxicol. 2025 Sep;44(3):233-249 Defined approaches to classify agrochemical formulations into EPA hazard categories developed using EpiOcular™ reconstructed human corneal epithelium and bovine corneal opacity and permeability assays AJ van der Zalm, et al. Cutan Ocul Toxicol. 2024 Mar;43(1):58-68 TR673 In-house Validation of the EpiOcular™ Eye Irritation Test and its Combination with the Bovine Corneal Opacity and Permeability Test for the Assessment of Ocular Irritation S Kolle, et al. Altern Lab Anim. 2011 Sep;39(4):365-87 TR785 The EpiOcular™ Eye Irritation Test is the Method of Choice for the In Vitro Eye Irritation Testing of Agrochemical Formulations: Correlation Analysis of EpiOcular Eye Irritation Test and BCOP Test Data According to the UN GHS, US EPA and Brazil ANVISA Classification Schemes S Kolle, et al. Altern Lab Anim. 2015 Jul;43(3):181-98.

安全性評価 EpiOcular ET-50　Time to Toxicity

ET-50法（Time-to-Toxicity Assay）
ET-50法は、組織生存率が50％に低下するサンプル添加時間（ET-50）を算出する試験法です。
Time pointを通常3点、4点で試験を行います。
刺激性物質：ET-50値が小さい
非刺激、弱刺激性物質：　ET-50値が大きい
MTTアッセイを用いて刺激性を定量的に評価できることから、界面活性剤、洗浄剤、シャンプー、化粧品原料および製剤の低刺激性評価に広く利用されています。原料、製剤を希釈せず原液のまま直接組織に塗布が可能です。30年以上にわたり多数の研究実績があります。
・CON4EI（Consortium for In Vitro Eye Irritation Testing Strategy）およびフォローアッププロジェクトALT4EI (ALTernatives for Eye Irritation)　での研究
・米国環境保護庁EPA 抗菌洗浄剤の試験法としてOCL-200 ET-50法を採用 ・参考文献 Subcategorization of Eye Irritants Using the EpiOcular Time-to-Toxicity Test S Letasiova, L Hudecova, et al.SOT2024 Poster P639 Abstract3463 TR823 CON4EI: CONsortium for in vitro Eye Irritation testing strategy - EpiOcular™ Time-to-Toxicity (EpiOcular ET-50) protocols for hazard identification and labelling of eye irritating chemicals H Kandarova, S Letasiova, et al.Toxicol In Vitro. 2018 Jun:49:34-52. ALT4EI: Determination of Eye Irritating Potential of 59 Chemicals Using EpiOcular™ Time-to-Toxicity Neat and Dilution Protocols L Hudecova1, S Letasiova, H Kandarova, et al. 11th World Congress on Alternatives and Animal Use in the Life Sciences WC11 2020 Poster,Abstract1104 TR1097 Modified Screening Methodology Evaluating the Ocular Irritation Potential Using Human Corneal Epithelium Model EpiOcular™ for Cosmetic and Personal-Care Products C Nabua, et al. American Society for Cellular and Computational Toxicology ASCCT2025 Poster 55 TR749 Ocular toxicity of authentic lunar dust VE Meyers, et al. BMC Ophthalmol. 2012 Jul 20:12:26

医療機器刺激性

医療機器の生物学的安全性評価における活用が期待されており、ISO-10993-23向けの眼刺激性試験としてISO TC 194 WG8（医療機器の生物学的評価のワーキンググループ）で協議が開始される予定です。 ・参考文献 TR1053 Development of Sensitive In Vitro Protocols for the Biocompatibility Testing of Medical Devices and Pharmaceuticals Intended for Contact with the Eyes: Acute Irritation and Phototoxicity Assessment P Pobi, J Kubalcov, T Milasova, H Kandarova, et al. Altern Lab Anim. 2024 Sep;52(5):261-275.

透過性評価・薬物評価

ヒト角膜上皮に近いバリア機能を利用し、薬物の透過性評価、ドラッグデリバリーシステム（DDS）研究に利用されています。また、薬物透過性と細胞生存率評価を組み合わせた研究にも活用されています。
推奨モデル；OCL-606

アプリケーション

眼刺激/Eye Irritation Test (OECD TG 492)
眼刺激/Eye Irritation (MTT ET-50)

製品情報1

モデル

仕様

角膜モデル複数個（OCL-200キットは24個）と培地、試薬、実験に必要なプレート類を含むキットです。角膜モデルは培養カップ（Culture insert）に構築されており、納品後すぐに実験が開始できます。

組織構造

5-8層（基底層からモデル表面）、非角化性多層構造

生産&出荷

全て受注生産、特定出荷日に通常月2回（保冷剤入り常温輸送）出荷します。詳細は『注文・納品ページ』と出荷カレンダーにてご確認ください。モデルは生産ごとにロット番号があり品質管理をしています。

細胞

由来

正常ヒト表皮角化細胞（Normal human epidermal keratinocytes ；NHEK）の単一ドナー細胞を使用。新生児包皮由来の細胞を用いています。

感染

全ての細胞は微生物、マイコプラズマ、B型およびC型肝炎ウイルス、HIVウイルスについて汚染のないことを確認しています。

インフォームドコンセント

インフォームドコンセントが得られた細胞を使用しています。

製品情報2

培地

培地

DMEMを基礎培地とした無血清培地を使用しています。

増殖因子

EGFやインスリン,ハイドロコーチゾン,非角化上皮分化促進物質を添加しています。

抗菌剤・抗生物質

ゲンタマイシン5μg/ml，アンフォテリシンＢ0.25μg/ml含有しています。
フェノールレッド、抗菌剤、抗生物質、ハイドロコーチゾンのフリー培地は対応可能です。
その他の特定因子を調整した特注培地をご希望であれば、弊社にお問い合わせください。

品質管理

出荷前に目視観察をしています。
OCL-200関連キット（OCL-606以外）では品質保証基準として細胞毒性Time-to-Toxicity ET-50値を採用しています。 出荷後保管したOCL-200を前培養し0.3％Triton X-100（OCL-200キット付属の陽性対照）を添加しMTTアッセイを実施します。
※品質管理試験のうちMTT ET-50アッセイは出荷後に実施されます。
※製品が品質基準外で不合格の際は弊社より納品後、1週間以内にご連絡させていただきます。

製品内容

Product Content

技術資料

Technical Data

• MatTek corporation Technical Reference List
• 日本の研究施設による参考文献,学会発表リスト

提携先MatTek社

Partner

製造元　MatTek corporation

所在地；200 Homer Avenue Ashland, MA 01721 U.S.A.
設立；1985年

米国マサチューセッツ州に本社をおく3次元モデルのリーディングカンパニー。
25 年以上にわたり、高い培養技術で、信頼性の高い in vitro ヒト組織モデルの開発を続けています。皮膚・眼モデルはOECDガイドラインにも採用され、さらに口腔、呼吸器、および腸管モデルは化粧品のみならず、化学、製薬、家庭用品業界で安全性と有効性を評価するために使用されています。
現在はスロバキアにもラボを持ち、米国や欧州を中心に、世界各国の多くの施設に製品を届けています。